1. 원심 분리 법 (centrifugation)
ㅇ 용액 내 입자 크기, 밀도(비중) 차이를 이용하여, 성분 분리하는 방법
- 회전 원심력을 이용하여, 침강 속도를 인위적으로 증가시킴
2. 원심 분리 원리
ㅇ 용액 내 입자에 작용하는 힘 (3개)
- 원심력 : (밖으로 밀어냄)
- 부력 : (유체에 의한 반대 방향 힘)
- 점성 저항력 : (이동 방해)
ㅇ 결과적으로
- 큰 입자 / 밀도 큰 입자 → 빠르게 침강
- 작은 입자 / 밀도 작은 입자 → 느리게 침강
3. 원심력 표현 및 단위
ㅇ 원심력 (Centrifugal Force) : F = m a = m ω2r
- a = ω2r : 원심력 가속도 [㎠/s]
- ω : 각속도 [rad/s]
ㅇ 상대 원심력 (RCF, Relative Centrifugal Force) : RCF = 1.118 x 10−5·r·(rpm)2
- 상대 원심력 : "지구 중력(g)의 몇 배인가?" → RCF = a / g = (ω2r) / g
- 1.118 x 10−5 : 상수
- r : 축에서 원심관의 중앙까지의 수평거리 [㎝]
- rpm : 분당 회전수
4. 원심 분리의 주요 영향 인자
ㅇ 입자 크기 : (↑ → 침강속도 ↑)
ㅇ 밀도 차이 : (입자 vs 용매)
ㅇ 점도 : (↑ → 침강속도 ↓)
ㅇ 회전속도 : (rpm, RCF)
ㅇ 반경 : r
5. 원심 분리기 유형
ㅇ 속도 기반 분류
- 저속 원심 분리 (Low-speed)
- 고속 원심 분리 (High-speed)
- 초 원심 분리 (Ultracentrifugation)
ㅇ 분리 방식 기반
- 차등 원심 분리 (Differential centrifugation)
. 크기 차이에 따라 단계적으로 침강
- 밀도 구배 원심 분리 (Density Gradient centrifugation)
. 밀도 차이에 따라 층별로 분리
. 더 정밀한 분리 가능
6. 운심 분리 응용 例)
ㅇ 혈액 성분 분리 : (혈장, 혈청, 적혈구, 백혈구)
ㅇ 세포 분획 (cell fractionation) : 특정 세포 소기관의 대량 취득
- (세포핵, 미토콘드리아 등)
ㅇ 단백질, DNA 정제